組培室是近年來比較流行的一種培養植物的地方,能夠清楚的觀察植物的生長,具有普通培養方式不具備的點,一套完整的組織培養房間是需要有一些設施備的,這一些設備也是培養植物不可缺少的,究竟需要配備哪些組培設備呢?針對這個問題,我們和上海農卉組培一起了解下。
一、常規設備
1、天平
組織培養實驗室需要2-3臺不同的天平。
感量0.001g的天平(分析天平)和感量0.0001g的天平(電子天平)用于稱量微量元素和一些較高度的實驗用品。
2、冰箱
培養基母液均需低溫報存,某些試驗還需植物材料進行低溫處理,一般普通冰箱即可。
3、酸度計
用于測定培養基及其它溶液的pH,一般要求可測定pH范圍1-14之間,準確度0.01即可。
4、離心機
用于細胞、原生質體等活細胞分離,亦用于培養細胞的細胞器、核酸以及蛋白質的分離提取。根據分離物質不同配置不同類型的離心機。
二、滅菌設備
1、高壓滅菌鍋
用于培養基、玻璃器皿以及其它可高溫滅菌用品的滅菌,根據規模大小有手提式、立式、臥式等不同規格。
2、干熱消毒柜
用于金屬工具如鑷子、剪刀、解剖刀,以及玻璃器皿的滅菌。一般選用200℃左右的普通或遠紅外消毒柜。
三、組培設備
組培設備是指根據需要所選用的不同規格和控制準確度的用于植物細胞、組織和器官培養的設施和設備。
1、培養架
目前培養架是組培室植株繁殖培養的通用設施,具有成本低、設計靈活、可充分利用培養空間等優點,以操作方便、大限度利用培養空間為原則。一般有4-5層,層間間隔40-50cm,光照強度可根據培養植物特性來確定,一般每架上配備2-4盞日光燈。
2、培養箱
細胞培養、原生質體培養等要求培養的實驗,可用光照培養箱、CO2培養箱、濕度控制培養箱等培養。
3、培養室
功能:對接種到培養瓶等器皿中的植物離體材料進行控制條件下的培養,無論是研究性實驗室還是生產性實驗材料進行培養的場所。
設備:培養架(控溫控光控濕)、搖床、轉床、自動控時器、紫外燈、光照培養箱或人工氣候箱、生化培養箱、邊臺實驗臺用于拍攝培養物生長狀況,除濕機、顯微鏡、溫濕度計、空調等。
要求:約需10~20 m2左右,培養室的大小可根據需要培養架的大小、數目、及其他附屬設備而定,其設計以充分利用空間和節省能源為原則;疽笫悄軌蚩刂乒庹蘸蜏囟,并保持相對的無菌環境;為滿足植物培養材料生長對氣體的需要,還應安裝排風窗和換氣扇等培養室的換氣裝置;為節省能源和空間,應配置適宜的培養架,并安裝日光燈照明。
4、無菌操作室(接種室)
功能:主要用于植物材料的消毒、接種、培養物的轉移、試管苗的繼代、原生質體的制備以及一切需要進行無菌操作的技術程序,是植物離體培養研究或生產中關鍵的一步。
設備:紫外燈、空調、解剖鏡、消毒器、酒精燈、接種器械(接種鑷子、剪刀、解剖刀、接種針),實驗臺、和擱架,還有凈工作臺和整套滅菌接種儀器、藥品等。
要求:接種室宜小不宜大,一般10~20 m2即可。要求封閉性好,干爽安靜,清潔明亮,能較長時間保持無菌,因此不宜設在容易受潮的地方;地面、天花板及四壁盡可能密閉光滑,易于清潔和消毒;配置拉動門,以減少開關門時的空氣擾動;為便于消毒處理,地面及內墻壁都應采用防水和耐腐蝕材料;為了保持清潔,無菌室應防止空氣對流。接種室要求在適當位置吊裝 1~2盞紫外線滅菌燈,用以照射滅菌。好安裝一小型空調,使室溫可控,這樣可使門窗緊閉,減少與外界空氣對流。
5、緩沖間
功能:進入無菌室前的一個緩沖場地,減少人體從外界帶入的塵埃等污染物。工作人員在此換上工作服、拖鞋,戴上口罩,才能進入無菌室和培養室。進入無菌操作室前在此更衣換鞋,以減少進出時帶入接種室雜菌。
設備:1~2盞紫外燈、水槽、實驗臺、鞋帽架、柜子、滅菌后的工作服、拖鞋、口罩。
要求:緩沖間需3~5 m2,可建在準備室外或無菌操作室外,應保持清潔無菌;備有鞋架和衣帽掛鉤,并有清潔的實驗用拖鞋、已滅菌過的工作服;墻頂用1~2盞紫外燈定時照射,對衣物進行滅菌。緩沖間好也安一盞紫外線滅菌燈,用以照射滅菌。緩沖間的門應該與接種室的門錯開,兩個門也不要同時開啟,以保證無菌室不因開門和人的進出帶進雜菌。